免疫組織化学染色試薬ヒストファイン50℃で十分に湯伸ばしした切片（4μm厚）をシランなどのコーティングスライド上に貼り付ける。⑧PBS（×10） 75mLキシレン3分間ティッシュ切片の周囲の余分な水分を拭き取る。ティッシュ切片の周囲の余分な水分を拭き取る。ティッシュ切片の周囲の余分な水分を拭き取る。750mL精製水⑧PBS（×10）75mLを精製水で750mLにメスアップする。キシレン3分間キシレン3分間＊各ステップごとによく液を切る。＊脱パラフィンを完全にするために、各溶液はスライド40枚ごとに取り換えることが好ましい。切片が完全に覆われるように、①抗原賦活化液を滴下し、湿潤箱中で反応させる。（18-25℃、5分間）切片が完全に覆われるように、②ブロッキング試薬Ⅰを滴下し、湿潤箱中で反応させる。（常温、5分間）切片が完全に覆われるように、③第一抗体または④陰性コントロールを滴下し、湿潤箱中で反応させる。（常温、30分間）＊各ステップでの反応温度、反応時間は厳密に守ること。＊特に温度指定のない場合は、常温（15〜25℃）で操作すること。＊染色結果に影響を及ぼす為、必ず下記の操作手順に従って操作を行うこと。染色結果に大きな影響を及ぼす為、処理の温度、時間等を正確に行う。1回洗浄で45mL使用した場合、全工程で750mL必要参考。切片を恒温器で十分乾燥させる。（37℃、24時間）100％エタノール3分間100％エタノール3分間①抗原賦活化液注）18-25℃に戻して から使用する。②ブロッキング試薬Ⅰ③第一抗体または④陰性コントロール95％エタノール3分間95％エタノール3分間（3分間、3回） PBSで洗浄する。（常温、3分間、3回） PBSで洗浄する。（常温、3分間、3回） PBSで洗浄する。（常温、3分間、3回）PBS●検体準備●PBS（洗浄用）の調製●脱パラフィン●抗原賦活化液による処理（プロテアーゼ処理）●ブロッキング試薬Ⅰによる処理（3vol％過酸化水素水による内因性ペルオキシダーゼ処理）●第一抗体［抗ヒトHER2/ 遺伝子産物モノクローナル抗体（SV2-61γ）（動物種：マウス）］または陰性コントロール ［マウスイムノグロブリン］の添加・反応neu58操作手順ヒストファインHER2キット（MONO）
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