免疫組織化学染色試薬ヒストファイン●脱パラフィン（パラフィン包埋切片）●第一抗体の添加・反応●シンプルステインAPの添加・反応●基質溶液の添加・反応●対比染色●封 入乾燥による脱水の後、キシレンに数秒間浸して透徹し、非水溶性封入剤で封入する。＊抗原賦活化処理および各反応条件等については、電子化された添付文書または使用説明書に従う。＊操作中の反応は、湿潤箱の中で行う。 キシレン3分間ティッシュ切片の周囲の余分な水分を拭き取る。ティッシュキシレン3分間キシレン3分間＊各ステップごとによく液を切る。＊脱パラフィンを完全にするために、各溶液はスライド40枚ごとに取り換えることが好ましい。切片の周囲の余分な水分を拭き取る。 切片が完全に覆われるように、 シンプルステインAPを滴下する。（常温、30分間）ティッシュ切片の周囲の余分な水分を拭き取る。＊各ステップでの反応温度、反応時間は厳密に守ること。＊特に温度指定のない場合は、常温（15〜25℃）で操作すること。＊染色結果に影響を及ぼす為、必ず下記の操作手順に従って操作を行うこと。100％エタノール100％エタノール3分間3分間切片が完全に覆われるように、第一抗体を滴下する。（常温）シンプルステインAPＰＢＳで洗浄する。（常温、3分間、3回）調製した基質溶液を滴下する。（常温、5ー20分間）ファーストレッドⅡ基質キットまたはニューフクシン基質キットを用いる。注）TBSでの洗浄を省略してファーストレッドⅡ基質キット を用いた場合、染色強度が弱くなる場合があるので、 反応時間を長くすること。95％エタノール95％エタノール3分間3分間第一抗体ＰＢＳで洗浄する。（常温、3分間、3回）TBSで洗浄する。（常温、3分間）ファーストレッドⅡ基質キットを用いる場合この操作は省略しても良い。ニューフクシン基質キットを用いる場合必須で行うこと。基質溶液精製水で洗浄する。PBS（3分間、3回）35操作手順ヒストファインシンプルステインAP
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